产品简介：
Ø本产品与BioZoL Plus（货号：BKM-ZL-P100）配合使用(替代氯仿），常用于从细胞、组织、细菌、酵母等样品中提取总RNA。
使用说明：
自备材料/准备工作
（1）请事先准备好75%乙醇、1.5ml EP管（CAT:BKM-EP-15F）若干。RNase 酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时灭活，但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能使RNase完全失活，它广泛存在于人的皮肤上，因此，在进行与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。
（2） 根据移液器制造商的要求对移液器进行处理，一般情况下采用RNase-free水（CAT:BKM-FW)配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取RNase-free的物品时必须戴手套。尽可能使用无菌，一次性塑料制品。
Ø组织样本
1.液氮研磨:组织块之间放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加入少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织加入1ml BioZoL plus，移至离心管进行下一步操作。
2.匀浆：组织样品按50-100mg组织加入1ml BioZoL plus。另外，组织体积不能超过BioZoL plus体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆机充分匀浆需要1-2分钟。
Ø细胞样本
1.培养贴壁细胞：不需消化，可直接用BioZoL plus进行消化、裂解，BioZoL plus体积按10 cm2/ml比例加入。
2.悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml BioZoL plus可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或者107细菌细胞。
Ø操作步骤
1. 细胞或组织匀浆液加BioZoL plus后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。
2. 按400μl RNAmate/ml BioZoL plus加入BioZoL plus，振荡混匀后室温放置5-15min。注：禁用漩涡振器，以免基因组DNA断裂。
注：对于脂肪组织，按800μl RNAmate/ml BioZoL plus加入BioZoL plus。
3.4℃，12000g离心15 min
4.吸取上层水相，至另一离心管中。注：千万不要吸取中间界面；若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相于4℃冰箱。
5.按0.5ml异丙醇/ml BioZoL plus加入异丙醇混匀（异丙醇体积与水相体积相当），室温放置1-5min。
6.4℃ 12000g离心10min，弃上清，RNA沉于管底。
7.按1ml 75%乙醇/ml BioZoL plus加入75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。
8. 4℃ 8000g离心5min，尽量弃上清。
9.室温晾干或真空干燥1-5min，注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。
10.可用50-100 μl RNase-free水（CAT:BKM-FW)或TE buffer（CAT:BKM-A00059)溶解RNA样品。
11.（可选）测OD值定量RNA浓度。注：此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之间（TE中会高些）；产率估计：组织样本:（μg RNA/mg组织）1-10 μg，培养细胞（μg RNA / 106 Cell）：5-15μg。
12.得到的RNA应尽快做下游实验。
注意事项：
Ø如不慎接触皮肤可立即用大量的洗涤剂和清水清洗。
ØRNAmate（氯仿替代物）和Trizol一起使用时请按5：1的用量（即：1ml Trizol加200ul的替代物）。
Ø为了您的安全和健康，请穿实验服并戴 一次性手套操作。
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