产品简介：
Ø本产品为热启动、高保真DNA 聚合酶，该酶具有5′-3′DNA 聚合酶活性和3′-5′外切酶活性，扩增能力强，延伸速度快，特异性好。适用于长短片段快速PCR扩增，1kb以内延伸速度可达1s/kb，大幅节省PCR反应时间，同时兼具一定的保真性和高产量的独特优点，其保真性约为Taq DNA聚合酶的80倍。扩增产物为平末端，对粗样品也具有优异的扩增性能。
产品组份：
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组份 |
BKM-PCR-H1 |
BKM-PCR-H5 |
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2×Bio HiFi PCR Mix |
1ml |
5x1ml |
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ddH2O |
1ml |
5x1ml |
使用说明：
PCR反应体系参考如下:
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组份 |
25ul体系 |
终浓度 |
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Template DNA |
适量 |
< 500ng |
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2×Bio HiFi PCR Mix |
12.5ul |
1x |
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Forward Primer（10 µM） |
0.5-1ul |
0.2-0.4µM |
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Reverse Primer（10 µM） |
0.5-1ul |
0.2-0.4µM |
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ddH2O |
up to 25ul |
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操作请在冰上进行，组分解冻后请充分混匀。 |
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PCR反应程序参考如下：
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步骤 |
温度 |
时间 |
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预变性 |
98℃ |
30s-3min |
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变性 |
98℃ |
10 s |
30-35个循环 |
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退火 |
根据引物Tm定 |
10 s |
30-35个循环 |
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延伸 |
72℃ |
1-20s/kb |
30-35个循环 |
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终延伸 |
72℃ |
5 min |
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备注： |
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1.预变性：质粒DNA、λDNA、简单基因组DNA等模板的预变性时间可设置为30s-1min，对于粗样品、高GC、人基因组等复杂的模板，预变性时间可延长至3min。 |
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2.退火：2×Super Flash Master Mix中含有较高离子浓度，反应退火温度可设置高于理论引物Tm值2-3°C，如无法得到理想的扩增效率时，可梯度改变退火温度，进行优化；发生非特异性反应时，适当提高退火温度。
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3.循环数：可根据扩增产物的下游应用设定循环数，如果循环次数太少，扩增量不足，循环次数太多，错配机率会增加，所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4.延伸：根据其目的片段长度设置延伸时间，参考下表
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注意事项：
Ø产品尽量避免反复冻融。
Ø为了您的安全和健康，请穿实验服并戴 一次性手套操作。
暂无使用说明!
暂无产品问答!
暂无参考文献
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