产品简介:
Ø本产品含0.25%胰蛋白酶,不含 EDTA和酚红,经0.1μm过滤除菌,可直接用于细胞消化。
使用说明:
Ø贴壁细胞的消化参考:
1.吸去培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
2.加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置 1-5 分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
3.显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
4.如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
5.如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰蛋白酶消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
注意事项:
Ø消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况。
Ø对于胰酶中EDTA、酚红的选择,可以根据实验需要,对于一般的肿瘤细胞,选择含EDTA的胰酶消化液。对于较敏感、脆弱的细胞,例如原代细胞及很容易消化的细胞,选择不含EDTA的胰酶消化液,如果细胞特别敏感,需要选择胰蛋白酶浓度更低的消化液。如果是需要用于流式细胞仪检测细胞凋亡,则选用不含EDTA的胰酶消化液。
Ø为了您的安全和健康,请穿实验服并戴 一次性手套操作。